اثر عصاره آبی- الکلی بنفشه و فراکسیون های آن بر تکثیر سلول های سرطان گردن رحم

نوع مقاله: اصیل پژوهشی

نویسندگان

1 دستیار گروه فارماکولوژی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد، ایران.

2 استادیار مرکز تحقیقات فارماکولوژی گیاهان دارویی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد، ایران.

3 دانشجوی دکترای داروسازی، دانشکده داروسازی، دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد، ایران.

چکیده

مقدمه: مطالعات اخیر نشان داده اند که گیاه بنفشه حاوی تعدادی ترکیبات سیکلوتیدی است که این ترکیبات اثرات
کشندگی سلولی قوی ایجاد می کنند. مطالعه حاضر با هدف بررسی اثر عصاره آبی- الکلی بنفشه و فراکسیون های آن
بر تکثیر سلول های سرطان گردن رحم انجام شد.
روشکار: با استفاده از دستگاه سوکسله و اتانول 70%، از قسمت های هوایی بنفشه سه رنگ، عصاره آبی- الکلی تهیه
و از این عصاره، سه فراکسیون آبی، اتیل استاتی و ان- بوتانولی استخراج شد. سلول های مذکور در پلیت کشت 96
خانه، کشت داده شدند و به مدت 24 ساعت در مجاورت غلظت های مختلف (400 ،200 ،100 ،0 و 800 میکروگرم
در میلی لیتر) عصاره یا فراکسیون ها قرار گرفتند. سپس میزان تکثیر سلول ها بر اساس روش احیاء MTT مورد
ارزیابی قرار گرفت. داده ها پس از گردآوری با استفاده از آزمون واریانس یک طرفه مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت.
از آزمون توکی برای مقایسه های چند گانه استفاده شد. نتایج به صورت انحراف معیار ± میانگین بیان شد و میزان p
کمتر از 0/05 معنی دار در نظر گرفته شد.
یافتهها: عصاره آبی- الکلی و فراکسیون ان- بوتانولی آن (در غلظت 800 میکروگرم در میلی لیتر) به ترتیب باعث
کاهش درصد سلول های زنده از 100 ± 5 درصد به p<0/01) 69 ± 5) و p<0/01) 51±7) درصد شد. همچنین،
غلظت های 400 و 800 میکروگرم در میلی لیتر از فراکسیون اتیل استاتی، درصد سلول های زنده را به ترتیب به 3
± p<0/05) 75) و p<0/001) 40 ± 3) درصد کاهش داد. هیچ یک از غلظت های فراکسیون آبی قادر به تغییر
درصد سلول های زنده نبود.
نتیجهگیری: عصاره آبی- الکلی بنفشه اثر مهاری قوی بر تکثیر سلول های سرطان گـردن رحـم دارد . مـاده یـا مـواد
 مؤثره مسئول این اثر، بیشتر در فراکسیون اتیل استاتی این گیاه قرار دارند.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

Effect of Hydro-Alcoholic Extracts of Viola Tricolor and its Fractions on Proliferation of Cervix Carcinoma Cells

نویسندگان [English]

  • Seyed Mohsen Mortazavian 1
  • Ahmad Ghorbani 2
  • Taghi Ghorbani Hesari 3
1 Assistant professor of Pharmacology, Faculty of Medicine, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran.
2 Assistant professor of Pharmacological Research Center of Medicinal Plants, Faculty of Medicine, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran.
3 Student of Pharmacy, Faculty of Pharmacy, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran.
چکیده [English]

Introduction: Recent studies have shown that Viola tricolor contains some cyclotide compounds which have potent cytotoxic effects. The present study was designed to investigate the effect of hydro-alcoholic extract of Viola tricolor and its fractions on proliferation of cervix carcinoma cells.
Methods: Using a soxhalet apparatus, the hydro-alcoholic extract was obtained which was further fractionated into aqueous fraction, ethyl acetate and n-butanol. The cells were cultivated in 96-well plate and incubated for 24 hours with different concentrations (0, 100, 200, 400 and 800 µg/ml) of the extract or its fractions. The cell-proliferation rate was determined by MTT colorimetric assay. Data was collected and analyzed by using one-way ANOVA. For multiple comparisons, Tukey test was used. Results were expressed as mean±SD. P value less than 0.05 was considered statistically significant.
Results: The hydro-alcoholic extract and n-butanol fraction, at 800 µg/ml, significantly reduced (31 and 49%, respectively) proliferation of Hela cells. Similarly, concentrations of 400 and 800 µg/ml of ethyl acetate fraction significantly decreased (25 and 60%, respectively) the surviving cells. None of the concentrations of aqueous fraction could change the percentage of live cells.
Conclusion: Hydro-alcoholic extract of V. tricolor exhibits potent inhibitory effect on proliferation of cervix carcinoma cells. The main component(s) containing this effect is most likely found in ethyl acetate fraction of this plant.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Carcinoma
  • Hela Cells
  • Viola tricolor
  • Uterine
1. World Health Organization. Cancer. Fact Sheets 2012 Feb;N297. Availble at:
http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs297/en/index.html
2. Magné N, Chargari C, Deutsch E, Castadot P, Ghalibafian M, Bourhis J, et al. Molecular profiling of uterine
cervix carcinoma: an overview with a special focus on rationally designed target-based anticancer agents.
Cancer Metastasis Rev 2008 Dec;27(4):737-50.
3. Harlev E, Nevo E, Lansky EP, Lansky S, Bishayee A. Anticancer attributes of desert plants: a review.
Anticancer Drugs 2012;23:255-71.
4. Sakarkar DM, Deshmukh VN. Ethnopharmacological review of traditional medicinal plants for anticancer
activity. Int J Pharm Tech Res 2011 Jan-Mar;3(1):298-308.
5. Tavakkol-Afshari J, Hajzadeh MA, Ghorbani A, Parsaie H. Ethanolic extract of Allium sativum has
antiproliferative effect on Hep2 and L929 cell lines. Pharmacogn Mag 2006;2(5):29-31.
6. Mousavi SH, Tavakkol-Afshari J, Brook A, Jafari-Anarkooli I. Role of caspases and Bax protein in saffroninduced
apoptosis in MCF-7 cells. Food Chem Toxicol 2009 Aug;47(8):1909-13.
7. Tayarani-Najaran Z, Mousavi SH, Asili J, Emami SA. Growth-inhibitory effect of Scutellaria lindbergii in
human cancer cell lines. Food Chem Toxicol 2010 Feb;48(2):599-604.
8. Toiu A, Parvu AE, Oniga L, Tamas M. Evaluation of anti-inflammatory activity of alcoholic extract from Viola
tricolor. Rev Med Chir Soc Med Nat Lasi 2007 Apr-Jun;111(2): 525-9.
9. Toiu A, Muntean E, Oniga L, Vostinaru O, Tamas M. Pharmacognostic research on Viola tricolor L.
(Violaceae). Rev Med Chir Soc Med Nat Lasi 2009 Jan-Mar;113(1):246-7.
10. Vukics V, Kery A, Bonn GK, Guttman A. Major flavonoid components of heartsease (Viola tricolor L.) and
their antioxidant activities. Anal Bioanal Chem 2008 Apr;390(7):1917-25.
11. Witkowska-Banaszczak E, Bylka W, Matlawska I, Goslinska O, Muszynski Z. Antimicrobial activity of Viola
tricolor herb. Fitoterapia 2005 Jul;76(5):458-61.
12. Tang J, Wang CK, Pan X, Yan H, Zeng G, Xu W, et al. Isolation and characterization of cytotoxic cyclotides
from Viola tricolor. Peptides 2010 Aug;31(8):1434-40.
13. Ghorbani A, Javadi Youssofabad N, Rakhshandeh H. Effect of Viola tricolor on pentobarbital-induced sleep in
mice. Afr J Pharm Pharmacol 2012 Sep;6(323):2503-9.
14. Saether O, Craik DJ, Campbell ID, Sletten K, Juul J, Norman DG. Elucidation of the primary and threedimensional
structure of the uterotonic polypeptide kalata B1. Biochem 1995 Apr;34(13):4147-58.
15. Daly NL, Rosengren KJ, Craik DJ. Discovery, structure and biological activities of cyclotides. Adv Drug Deliv
Rev 2009 Sep 30;61(11):918-30.
16. Scherer WF, Syverton JT, Gey GO. Studies on the propagation in vitro of poliomyelitis viruses. IV. Viral
multiplication in a stable strain of human malignant epithelial cells (strain HeLa) derived from an epidermoid
carcinoma of the cervix. J Exp Med 1953 May;97(5):695-710.
17. Rakhshandah H, Boskabady MH, Mossavi Z, Gholami M, Saberi Z. The differences in the relaxant effects of
different fractions of Rosa damascena on guinea pig tracheal smooth muscle. Iran J Basic Med Sci 2010
Summer;13(3):126-32.
18. Ghorbani A, Rakhshandeh H, Asadpour E, Sadeghnia HR. Effects of Coriandrum sativum extracts on
glucose/serum deprivation-induced neuronal cell death. Avicenna J Phytomed 2012 Winter;2(1):4-9. 
 
19. Sadeghnia HR, Farahmand SK, Asadpour E, Rakhshandeh H, Ghorbani A. Neuroprotective effect of Lactuca
sativa on glucose/serum deprivation-induced cell death. Afr J Pharm Pharmacol 2012 Sep;6(33):2464-71.
20. Rakhshandeh H, Sadeghnia HR, Ghorbani A. Sleep-prolonging effect of Coriandrum sativum hydro-alcoholic
extract in mice. Nat Prod Res 2012;26(22):2095-8.
21. Hajzadeh MA, Tavakkol-Afshari J, Ghorbani A, Shakeri MT. Antiproliferative property of aqueous extract of
garlic on human larynx tumour and non-tumour mouse fibroblast cell lines. Aust J Med Herbalism 2007
Spring;19:33-7.
22. Seidel V. Initial and bulk extraction. In: Sarker SD, Latif Z, Gray AI. Natural product isolation. 2nd ed. New
Jersey:Humana Press;2006:27-46.
23. Dominguez M, Keck AS, Jeffery EH, Cespedes CL. Effects of extracts, flavonoids and iridoids from Penstemon
gentianoides (Plantaginaceae) on inhibition of inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase-2 (COX-
2) in LPS-Activated RAW 264.7 macrophage cells and their antioxidant activity. Bol Latin Car Plant Med
Aromát 2010;9:397-413.
24. Tian S, Shi Y, Zhou X, Ge L, Upur H. Total polyphenolic (flavonoids) content and antioxidant capacity of
different Ziziphora clinopodioides Lam extracts. Pharmacogn Mag 2011 Jan;7(25):65-8.
25. Svangard E, Goransson U, Hocaoglu Z, Gullbo J, Larsson R, Claeson P, et al. Cytotoxic cyclotides from Viola
tricolor. J Nat Prod 2004 Feb;67(2):144-7.
26. Kanadaswami C, Lee L, Lee PP, Hwang JJ, Ke FC, Huang YT, et al. The antitumor activities of flavonoids. In
Vivo 2005 Sep-Oct;19(5):895-910.
27. Deschner EE, Ruperto JF, Wong G, Newmark HL. Quercetin and rutin as inhibitors of azoxymethanol-induced
colonic neoplasia. Carcinogenesis 1991 Jul;12(7):1193-6.
28. Yang K, Lamprecht SA, Liu Y, Shinozaki H, Fan K, Leung D, et al. Chemoprevention studies of the flavonoids
quercetin and rutin in normal and azoxymethanol-treated mouse colon. Carcinogenesis 2000 Sep;21(9):1655-60.
29. Mortazavian SM, Ghorbani A. Antiproliferative effect of viola tricolor on neuroblastoma cells in vitro. Aust J
Med Herbalism 2012;24:93-6.